Morphological changes in the tissues of the experimental model of hemangioma with concurrent medication of β-blockers and interstitial introduction of the Kenalog preparation.

Abstract


Relevance. Hemangiomas are the most common variety among tumors of the skin and soft tissues in children. The number of patients with this pathology is currently increasing. There are many methods to therapy hemangiomas in children. Currently, such drugs as Propranolol and Kenalog are widely used in the treatment of this pathology.

Aim. Study the effect of β - blockers and the preparation of Kenalog on the tissues of the experimental model of hemangioma with simultaneous introduction.

Materials and methods. For the experimental study, 20 live chickens were used. The histological structure of the vascular or capillary zone of the crest of the chicken resembles the human angioma. All chickens were divided into 4 groups of 5 individuals. Observing the general condition of chickens, macroscopic and histological examination of the crest of the hens were carried out.

Results and conclusions. By the 15th day, all the chickens from the experimental group had died presumably because of massive vascular thrombosis. According to the result given above, simultaneous ingestion of β-blockers and interstitial administration of the Kenalog product are not recommended because of the possibility of thrombus formation and a high probability of death.


Гемангиомы являются самой распространенной разновидностью среди опухолей кожи и мягких тканей у детей. В последние годы отмечается тенденция к росту числа больных с этой патологией [1]. По сведениям некоторых авторов, гемангиомы встречаются в 1,1 – 2,6 % случаев [2], по другим данным – в 4-10 % [3]. Отмечается преимущественно у девочек (примерно соотношение 3:1), у недоношенных и маловесных детей [4,5].
Существует множество способов лечения гемангиом у детей [6]. В настоящее время в лечении данной патологиишироко используются такие препараты как Пропранолол [7,8,9] и Кеналог [10]. В некоторых случаях невозможно добиться полного исчезновения гемангиом при лечении одним из данных препаратов.
Выбор метода лечения гемангиом представляет сложную задачу для врача и зависит от многих факторов, среди которых следует отметить интенсивность роста, размеры, форма, локализация образования, возраст и соматическое состояние ребенка [11,12]. Среди авторов нет единства мнений в отношении выбора метода лечения, отсутствуют объективные критерии прогнозирования, течения патологического процесса и оценки результатов коррекции. Наличие осложнений спонтанного характера, а также косметических дефектов, возникающих в результате системного и локального лечения, требует дальнейших разработок и индивидуализации тактики лечения гемангиом у детей [13]. Практически все авторы признают факт спонтанной регрессии гемангиом, в связи с чем долгое время доминировала тактика «не трогать и дожидаться исчезновения». В настоящее время, чтобы избежать психосоциальных последствий и достижения высокого эстетического результата современная медицина стремится излечить видимые дефекты к трем годам. Выше изложенное обуславливает актуальность и клиническую значимость настоящего исследования.
Цель исследования. Изучение влияния β – блокаторов и препарата Кеналог на ткани экспериментальной модели гемангиомы при одновременном введении.
Материалы и методы
Для изучения комбинированного влияния β – блокаторов и препарата Кеналог на ткани гемангиомы проведено экспериментальное исследование на модели сосудистой опухоли – гребне живых кур.
Гистологическое строение сосудистой или капиллярной зоны гребня кур напоминает ангиому человека, поскольку состоит из большого количества тесно прилегающих друг к другу сосудов капиллярного типа, местами разделенных прослойками соединительной ткани. Стенка капилляров выстлана одним слоем эндотелиальных клеток. Мышечная прослойка имеет вид рыхлой волокнистой соединительной ткани [10,14,15].
Нами проведено гистологическое изучение изменений гребня живых кур после приема β – блокаторов внутрь с одновременным внутритканевым введением препарата Кеналог(исследование проводилось с использованием микроскопа NickonEclipseNi-Uc с камерой Nickon DS-Fil). Эксперименты выполнены в центральной научно-исследовательской лаборатории (ЦНИЛ) с одобрения локального этического комитета Медицинского института ФГБОУ ВО «Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева» и одобрены локальным этическим комитетом медицинского института ФГБОУ ВО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева» (протокол №32 от 5 декабря 2015 г.).
Для эксперимента использовались гребни 20 живых кур в возрасте 150-200 суток. Птиц разделили на четыре группы по 5 особей. Условия исследуемых групп было одинаковым, физиологическое состояние птиц – в норме.
В гребни птиц первой группы вводили 1 мл 0,9% раствора NaCl (контрольная группа). Второй группе вводили препарат Анаприлин 2,0 мг/кг per os (группа сравнения). В третьей группе в гребни живых птиц вводили 1 мл препарата Кеналог(группа сравнения). Четвертую группу использовали для моделирования воздействия при комбинированном приеме препарата Анаприлинperos и внутритканевого введения препарата Кеналог. После проведения экспериментальных воздействий осуществляли ежедневный визуальный осмотр куриных гребешков, проводили оценку морфологических изменений и общего состояния птиц. Биопсию гребешка под местным обезболиванием Sol. Novocaini 0,5 % - 2 мл осуществляли на 1, 7, 14, 21, 28 сутки исследования. Макропрепарат фиксировали в 10% растворе формальдегида. Препараты окрашивали гематоксилином-эозином.
Результаты и их обсуждение
В контрольной группе после введении 0,9% раствора NaClмакроскопически целостность гребешка сохранялась, отмечалась синюшность всего гребня живой курицы, отчетливо визуализировалась гематома в месте введения. Микроскопически отмечалась лейкоцитарная инфильтрация, свободных эритроцитов и отек тканей, просвет сосудов был проходим. К 28 дню макроскопически и микроскопически отмечалось полное восстановление структуры гребня курицы.
В сравнительной группе с использованием препарата Анаприлинperos на первые сутки макроскопически на гребне наблюдались небольшие участки синюшного цвета, с 14 по 28 день приема макроскопически отмечалось постепенное уменьшение размера гребня, синюшность и его сухость. Микроскопически отмечалось увеличение рогового слоя поверхностного эпителия, уплотнение центральной части соединительно-тканного слоя. Просвет сосудов оставался чистым (рис. 1).
В третьей группе (сравнительная группа) после внутритканевого введения препарата Кеналогс 7 суток отмечалось постепенное заполнение сосудов рыхлыми тромбами с последующим их стяжением и зарастанием фиброзной тканью. Также происходило утолщение слоя плотной волокнистой соединительной ткани, ороговевающий эпителий слущивался. В фиброзно-жировом слое прослеживались участки «пустоты» без клеточного состава (рис. 2). Микроскопически к 28 суткам соединительная ткань дегенерировала, объем ее уменьшался, что в объективе микроскопа можно было наблюдать весь гребешок с двух сторон при 10*10 увеличении (рис. 3). Макроскопически отмечалось уменьшение гребешка в объеме.
Куры сравнительных и контрольной групп не выводились из опыта, остались живы.
В экспериментальной группе комбинированного применения препарата Анаприлин внутрь с внутритканевым введением препарата Кеналог с 7 дня макроскопически отмечались уменьшение гребня в объеме, синюшность периферической части, сухость ткани, сморщивание по периферии зубцов гребня. Микроскопически наблюдалось укорачивание и утолщение волокон соединительно-тканного слоя, разрыхление, вакуолизация и лейкоцитарная инфильтрация ткани. Имелись пристеночные тромбы в артериях и сосудах капиллярного русла, вены были проходимы (рис. 4).
На 13 сутки у 2-х кур из 3 отмечалось ухудшение общего состояния: вялость, сонливость. На 14 сутки макроскопически отмечалась бледность гребня, синюшность его зубцов, участки некроза в дистальной части зубцов (рис. 5). Микроскопически наблюдалось уплотнение капиллярной части, возможно, из-за нарушения питания ткани. Часть капилляров при этом тромбирована полностью, а часть частично (Рис. 6). В срединной части отмечалось разволокнение соединительной ткани, часть артерий тромбированы полностью, а часть артерий частично (рис. 7).
На 15 стуки 2 курицы из данной группы погибли. При вскрытие в полостях сердца отмечалось тромбообразование (рис. 8). У третьей курицы отмечалась вялость, сонливость. На следующий день она погибла. Курица из этой группы выведенная из эксперимента на 7 сутки, так же погибла.
Выводы
Предположительно, одновременный прием препарата Анаприлин per os и внутритканевое введение препарата Кеналог приводит к изменению реологических свойств крови курицы–массивному пристеночному тромбированию сосудов как крупного, так и мелкого калибра и, как следствие, гибели экспериментальных животных к 15 суткам эксперимента. Учитывая вышеуказанный результат, не рекомендуется одновременный прием препаратов из-за возможности изменения реалогических свойств крови и повышения тромбообразования. Требуется дальнейшее дообследование, с целью изучения биохимических реакций, происходящих в организме экспериментальных животных, которые приводят к изменению реологических свойств крови.
С целью уменьшения объема образования можно рекомендовать как внутритканевое введение препарата Кеналог, так и прием Анаприлина per os в соответствующей дозировке.

Nicolai Alexsandrovich Okunev

Of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogarev"; GBUZ RM CHILDREN'S REPUBLICAN CLINICAL HOSPITAL

Email: nicolai.okunev@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0001-8786-6998
SPIN-code: 9705-0818

Russian Federation, 430005, Russia, Saransk, Bolshevistskaya, 68; 430000, Russia, Saransk, Polezhaeva str., 113

doctor of medical Sciences, Professor of the course pediatric surgery, Department of faculty surgery with the course of topographic anatomy and operative surgery, urology and pediatric surgery, medical Institute of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogareva

Alexandra Ivanovna Okuneva

Of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogarev"

Author for correspondence.
Email: ToropkinaOkuneva@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-7182-2197
SPIN-code: 9726-0748

Russian Federation, 430005, Russia, Saransk, Bolshevistskaya, 68

PhD, senior lecturer in pediatric surgery, Department of faculty surgery with the course of topographic anatomy and operative surgery, urology and pediatric surgery, medical Institute of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogareva

Alexandr Alexsandrovich Shilov

Of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogarev"

Email: sasha6308@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-6876-2480
SPIN-code: 2040-1637

Russian Federation, 430005, Russia, Saransk, Bolshevistskaya, 68

student 6 course specialty "Pediatrics", the medical Institute of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogareva

Vladimir Pavlovich Balashov

Of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogarev"

Email: bvp63@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-9419-1498
SPIN-code: 2248-1122

Russian Federation, 430005, Russia, Saransk, Bolshevistskaya, 68

doctor of biological Sciences, Professor, head of Department of Cytology, histology and embryology courses in medical biology and molecular cell biology, medical Institute of the "national research Mordovian state University. N. P. Ogarev

Oleg Alexsandrovich Shchekin

GBUZ RM CHILDREN'S REPUBLICAN CLINICAL HOSPITAL

Email: medmajor@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2880-3505
SPIN-code: 5086-2855
430000, Russia, Saransk, Polezhaeva str., 113

Deputy chief physician for clinical and expert work of GBUZ RM children's Republican clinical hospital

  • Popova OA, Uvarov DN, Spivakovskii YuM. New opportunities in the conservative therapy of hemangiomas in children. Saratov Journal of Medical Scientific Research. 2014;10(2): 332-335. (in Russ).
  • Kozhevnikov EV, Markina IV, Kozhevnivov VA. Diagnosis and treatment of extensive combined hemangiomas and hemangiomas of complex anatomical localization in children. Russian Journal of Pediatric Surgery. 2009; 99(6):31-34. (in Russ).
  • Holcomb GW, Murphy JP. Ashkraft’s Pediatric Surgery. 5th ed. Philadelphia: Saunders Elsevier; 2010.
  • Isakov YuF, Razumovskii AYu. Pediatric surgery: textbook. Moscow: GEOTAR-Media; 2015. (in Russ).
  • Gutkin DV, Lagunova ZV, Pancheshnikova ES, Potekaev NN, Tkachenko SB. Hemangiomas: etiology and pathogenesis. Eksperimental'naya i klinicheskaya dermatokosmetologiya. 2004; N.2: 20-23. (in Russ).
  • Shafranov VV, Butorina AV. Treatment of hemangiomas in children. Doctor. 1996; N. 9: 17-18. (in Russ).
  • Drolet BA, Frommelt PS,Chamlin SL, Haggstrom A, Bauman NM, Chiu YE. Initiation and use of propranolol for infantile hemangioma: report of a consensus conference. Pediatrics. 2013;131(1):128-40.
  • Nurmeev IN, Mirolyubov LM, Nurmeeva AR, Nurmeev NN, Umarov NA. A program for the conservative treatment of hemangiomas in children. Russian Journal of Pediatric Surgery. 2014; 18(3):39-41. (in Russ).
  • Nurmeeva AR. Sovershenstvovanie diagnostiki i konservativnoi taktiki lecheniya gemangiom u detei [dissertation]. Kazan'; 2016. (in Russ).
  • Okuneva AI. Lechenie gemangiom kozhnykh pokrovov u detei metodom vnutritkanevogo vvedeniya preparata triamtsinolon (Kenalog®) i v sochetanii s kriodestruktsiei [dissertation]. Moscow; 2014.
  • Butorina A., Shafranov A., Polyaev Yu. Hemangiomas in children: Synopsis of a doctor. Meditsinskaya gazeta. 2000 April 5 N 26. (in Russ).
  • Butorina AV, Shafranov AV. Modern treatment of hemangiomas in children. Lechashchii vrach. 1999. 40(5): 61-64. (in Russ).
  • Burns AJ, Navarro JA, Cooner RD. Classification of vascular anomalies and the comprehensive treatment of hemangiomas. Plast Re-constr. 2009; 124(1):69-81. doi: 10.1097/prs.0b013e3181aa1015.
  • Kazanova NI. Gemangioma polosti nosa i glotki [dissertation]. Moscow; 2008.
  • Okunev NA, Okuneva AI, Vlasov AP, Gerasimenko AV. Local cryodestruction of hemangiomas in children. Vestnik of Experimental and Clinical Surgery. 2013. 6(2):195-201.

Supplementary files

There are no supplementary files to display.

Views

Abstract - 38

PDF (Russian) - 16


Copyright (c) 2018 Okunev N.A., Okuneva A.I., Shilov A.A., Balashov V.P., Shchekin O.A.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.