Pharmacological Correction of Violations of Microcirculation, and Ischemic Damage of the Muscle Tissue in Experimental Critical Limb Ischemia

Abstract


Objective. Experimental substantiation of possibility of application of the drug "Myelopid" in the treatment of experimental critical limb ischemia.

Methods. The experiments were conducted in 130 white male rats of Wistar line. Experimental animals were divided into five groups: intact, control, first, second and third experienced. In the intact group consisted of 10 rats, which is evaluated at the normal level of the microcirculation. In the other groups was incorporated on 30 male rats each, which was modeled critical ischemia of the right hind limb by excision of the femoral and popliteal arteries. In the control group, the treatment was not carried out. In the first group of experimental animals received the drug "Myelopid" at 50 µg/kg in thigh muscle after 3 hours after surgery, and then through one, two, three days. In the second group the rats were injected the drugs "Actovegin" and the third "Solcoseryl" intraperitoneally at a dose of 50 µg/kg 3 hours after operation, and then daily for five days. Assessment of the level of microcirculation in the calf muscles of the rats were performed by laser Doppler flowmetry (LDF) on 10-th, 21-th and 28-th day of the experiment, at the same time produced a histological examination of the ischemic muscle, which was determined the dynamics of the mean diameter of the arterioles, capillaries, venules, muscle fibers, the level of arterio-venular shunting, areas of necrosis and density of the capillary network.

Results. The level of the microcirculation in the first group of animals was surpassed on the 10th day of the experiment, the same indicator in the second and third groups of 1.24, on the 21st day - of 1.18, and on the 28th day in the second group of 1.42 and in the third - 1.71 times. Level arterio-venular shunting in animals that were treated with myelopid, was below on the 21st day of the experiment, 8.1%, than in animals treated need to go and 17.3% - treated by solcoseryl. For 10 days the area of necrosis of muscle fibers in animals treated with myelopid, was significantly less by 13.2% than in the group of animals who were injected with Actovegin and 7.5% in the third group of animals treated with Solcoseryl in, on the 21st day respectively by 10.8% and 11.1%, 28 days - 5% and 6%. The density of the capillary network on the 10th day in the first group was superior to 1.25 density in the second group and 1.34 in the third, on the 21st day, respectively, 1.2 and 1.4, on the 28th day – of 1.46 and 1.47 times.

Conclusion. The experimental treatment of critical limb ischemia by the drug "Myelopid" is pathogenetically justified and effective.

Key words: critical limb ischaemia, treatment, Myelopid, Actovegin, Solcoseryl.


Введение

Хроническим облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей в России страдает около 3 млн. человек. У 140-150 тыс. пациентов ежегодно развивается критическая ишемия, которая приводит к высокой ампутации и потери конечности у 30-40 тыс. человек [7]. В связи с неуклонным старением населения в промышленно развитых странах, глобальным увеличением распространенности метаболического синдрома, сахарного диабета, курения, артериальной гипертензии и ожирения прогнозируется значительное увеличение числа больных [15].

Предшествующими исследованиями было установлено, что в основе критической ишемии лежат нарушения в микроциркуляторном русле [8]. Патофизиологические механизмы нарушения микроциркуляции начинаются с уменьшения притока крови по артериолам, что приводит к компенсаторному венозному застою в венулах, выравниванию давления на артериальном и венозном отрезке капилляра с развитием капилляростаза [1]. Именно капилляростаз является центральным звеном механизма развития критической ишемии в результате которого резко нарушаются обменные процессы и развиваются ишемические повреждения мягких тканей дистальных отделов конечностей [12].

Механизмом регулирования кровотока в микроциркуляторном русле ишемизированной конечности является артериовенулярное шунтирование, которое позволяет уменьшить приток крови в капилляры, но увеличивает ишемическое повреждение мышечной ткани в результате прогрессирующей гипоксии [2]. Следовательно, лекарственная терапия при критической ишемии конечностей должна быть направлена на устранение нарушений микроциркуляции, ликвидации капилляростаза, уменьшение артериовенулярного шунтирования, предупреждение ишемических повреждений ткани. Наиболее для этих целей подходят препараты, обладающие ангиопротекторными, антиоксидантными, антигипоксическими и репаративными свойствами. Такими препаратами являются актовегин и солкосерил, являющиеся стимуляторами регенерации ткани. Данные препараты широко применяются для лечения критической ишемии [9]. Поэтому, их можно использовать в качестве сравнительного стандарта при изучении эффективности новых лекарственных препаратов для лечения критической ишемии [13].

Интенсивное изучение клеточных механизмов ангиогенеза и выделение клеток-предшественников сосудистого эндотелия и ангиобластов позволила сначала в экспериментальных, а затем в клинических условиях для лечения ишемии тканей широко применять стволовые клетки, содержащиеся в мононуклеарной фракции костного мозга [10,16].

Однако, выделение стволовых клеток из костного мозга является слишком затратным с экономической точки зрения. В то же время имеются фармакологические препараты из клеток костного мозга, которые в основном применяются как иммуностимуляторы при вторичных иммунодефицитных состояниях, а действие их на ишемизированне ткани не изучено. Одним из таких препаратов является миелопид – экстракт из костного мозга телят, который применяется при иммунодефицитных состояниях после хирургических операций, механических, термических и химических травмах. Критическую ишемию конечностей можно рассматривать как ишемическое повреждение тканей конечностей вследствие недостаточного поступления артериальной крови. Следовательно, можно ожидать позитивного влияния препарата на течение критической ишемии конечностей.

Цель работы – сравнить эффективность миелопида, актовегина и солкосерила в лечении критической ишемии конечностей.

Материалы и методы. Опыты проводились на 130 белых крысах-самцах линии Wistar массой 300-350 г без внешних признаков заболевания, находящихся в виварии Курского государственного медицинского университета в одинаковых условиях на стандартном пищевом режиме. Операции и все манипуляции с крысами проводились в условиях общего обезболивания. Эвтаназию осуществляли при помощи передозировки средств для наркоза в соответствии с «Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей», принятой Советом Европы (Strasbourg, Франция, 1986) и Директивой Совета 86/609/ЕЕС от 24.11.1986 «По согласованию законов, правил и административных распоряжений стран участниц в отношении защиты животных, используемых в экспериментальных и научных целях».

Экспериментальные животные были разделены на пять групп: интактную, контрольную, первую, вторую и третью опытные. В интактную группу вошло 10 крыс, у которых оценен нормальный уровень микроциркуляции. В остальных группах было включено по 30 крыс-самцов в каждую, у которых моделировали критическую ишемию правой задней конечности следующим образом. Под наркозом хлоралгидратом в дозе 250-300 мг/кг животных фиксировали на спине, затем после соответствующей подготовки операционного поля (сбривание шерсти и обработка 70% раствором спирта) выполняли разрез кожи по внутренней поверхности бедра на всю длину области. Выделяли элементы сосудисто-нервного пучка бедра. Артерию отделяли от вены и нерва, мобилизовали (пересекали отходящие от нее ветви первого порядка). Накладывали лигатуры на артерию у места ее начала (под паховой связкой) и пересекали. Перевязывали и пересекали a. saphena (аналог глубокой артерии бедра у человека). Выделяли подколенную артерию и начальные отделы артерий голени (бифуркация подколенной артерии), которые пересекали. Участок магистрального сосуда, включающий бедренную, подколенную артерию и начальные отделы артерий голени удаляли. Значимого ретроградного кровотечения из артерий голени не наблюдалось, поэтому лигатуры не накладывались. Рану на бедре ушивали непрерывным швом.

В контрольной группе лечение не проводилось. В первой группе экспериментальные животные получали препарат «Миелопид» по 50 мкг/кг в мышцы бедра через 3 часа после операции, затем через одни, двое, трое суток.

Во второй группе крысам вводили препарат «Актовегин», а в третьей - «Солкосерил» интраперитонеально в дозе 50 мкг/кг через 3 часа после операции, затем ежедневно в течение пяти суток.

Оценка уровня микроциркуляции в мышцах голени крыс выполнялась методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) на 10-е, 21-е и 28-е сутки эксперимента. Исследование осуществляли при помощи аппарата – лазер-допплеровского флоуметра “Biopac-systems MP-100” и датчика “TSD-144”. Запись и обработка данных производилась при помощи программы AcqKnowledge 38. Исследование выполняли под наркозом хлоралгидратом в дозе 250-300 мг/кг, который вводили внутрибрюшинно в виде водного раствора. После наступления наркотического сна иссекали участок кожи на передне-латеральной поверхности правого голени задней конечности. Животное укладывали на противоположную сторону. Датчик вплотную приставляли к мышце бедра, затем голени и проводили флоуметрию. Уровень микроциркуляции регистрировали в пяти точках: 1) середина длины мышцы; точки на 3-4 мм 2) выше, 3) ниже, 4) латеральнее и 5) медиальнее от первой. Запись кривой уровня микроциркуляции проводили в течение 30 сек в каждой точке. Из полученных пяти значений выводили среднее, которое вносили в протокол и принимали за уровень микроциркуляции в мышцах голени у данного животного. Из полученных 10 значений у разных животных выводили среднее, которое принимали за уровень микроциркуляции в данной группе животных на данном сроке исследования.

Лабораторные животные выводились из эксперимента путем передозировки наркоза на 10, 21 и 28 сутки. Ишемизированные мышцы голени иссекали и фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. После фиксации из каждой мышцы вырезали по 2 кусочка и после дегидратации в спиртах восходящей крепости заливали в парафин по общепринятой методике. Парафиновые срезы толщиной 7-10 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Для количественной оценки диаметров артериол, капилляров, венул, мышечных волокон, зоны некроза и плотности капиллярной сети использовали планиметрию срезов. Изготовленные препараты смотрели в 20 полях зрения с помощью окуляр-микрометра. Уровень артериовенулярного шунтирования оценивался следующим образом по формуле:

 

где, Ø вен – средний диаметр венул, Ø арт – средний диаметр артериол.

Полученные данные обработаны статистически: рассчитаны средние значения сдвигов (М), средняя ошибка средней арифметической (±m) и вероятность возможной ошибки (p), рассчитанной с использованием критерия Стьюдента для групп с различной дисперсией. Различия оценивали как достоверные при p<0,05. Статистические расчеты проводились с использованием программы Microsoft Excel 2007, Statistica (v.6.0).

 

Результаты исследования.

Несмотря на достаточную агрессивность модели экспериментальной патологии и развития выраженной острой ишемии конечности, по прошествии 3-4 суток у животных наблюдалась относительная компенсация артериальной недостаточности: конечность включалась в акт передвижения, исчезал или уменьшался ишемический отек. Параллельно с течением времени появлялись признаки формирующейся критической ишемии конечности, частота симптомов которой при данной экспериментальной модели опубликована нами ранее [11].

При изучении артериального притока в микроциркуляторное русло мышц на фоне критической экспериментальной ишемии по данным среднего диаметра артериол получены следующие результаты, которые представлены в таблице 1.

Таблица 1

Table 1

Динамика среднего диаметра артериол в группах экспериментальных животных, (M+m в микрометрах, n=10)

Dynamics of the average diameter of arterioles in experimental groups of animals (M+m µm, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

11,41±0,15

11,8±0,25

11,63±0,15

1 группа group

12,8±6,2*

14,8±5,3*

15,2±2,6*

2 группа group

13,32±1,25*

15,28±1,15*

16,4±0,95*

3 группа group

13,63±1,75*

11,94±2,05*

15,59±1,35*

Примечание: * - при p<0,05 в сравнении с контрольной группой.

У животных в интактной группе средний диаметр артериол на всех сроках эксперимента составлял 15,1±4,5 мкм. Из таблицы видно, что диаметр артериол в ишемизированной конечности во всех исследуемых группах был достоверно выше по сравнению с контрольной: при лечении миелопидом на 10 сутки на 1.4 мкм, на 21 сутки – на 3,0, на 28 сутки – на 3,6; при применении актовегина на 10 сутки на 1,9 мкм, на 21 сутки – на 3,5, на 28 сутки - на 4,8; после применения солкосерила на 10 сутки в среднем на 3 мкм, на 21 сутки – на 0,1, на 28 сутки на 4 мкм.

Динамика среднего диаметра капилляров на разных сроках эксперимента представлена в таблице 2.

Таблица 2.

Table 2

Динамика среднего диаметра капилляров в группах экспериментальных животных, (M+m в микрометрах, n=10)

Dynamics of the average diameter of capillaries in the experimental groups of animals (M+m µm, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

3,72±0,45

4,57±0,93

4,53±0,64

1 группа group

4,73±0,51*

5,5±0,23*

6,9±0,67*

2 группа group

4,96±0,22*

4,69±0,17*

6,17±0,35*

3 группа group

4,49±0,67*

3,94±0,13*

4,85±0,55*

Примечание: * - при p<0,05 в сравнении с контрольной группой.

Диаметр капилляров в интактной группе животных колебался в пределах 7,1±1,7 мкм на всех сроках эксперимента. Из таблицы видно, что диаметр капилляров в ишемизированной конечности в группе животных, пролеченных миелопидом, был достоверно выше на всех сроках эксперимента, особенно к 28 суткам, на 2,37 мкм в сравнении с контрольной группой. После применения актовегина средний диаметр капилляров на 10 сутки был выше на 1,24 мкм, на 21 – на 0,12 мкм, на 28 – на 1,54 мкм в сравнении с контрольной группой животных. Солкосерил также увеличивал средний диаметр капилляров в сравнении с контрольной группой, однако, в меньшей степени: на 10 сутки на 0,77 мкм, а на 28 – на 0,32 мкм.

Динамика плотности капилляров в группах экспериментальных животных, путем определения количества капилляров в окуляре микрометра, представлена в таблице 3.

Таблица 3.

Table 3.

Динамика плотности капилляров (M+m в микрометрах, n=10)

Dynamics of capillary density (M+m µm, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

20,87±6,34

24,95±5,33

28,25±4,89

1 группа group

29,01±5,42*#

34,68±6,12*#

45,57±7,25*#

2 группа group

23,21±3,12*

28,9±4,42*

31,12±4,35*

3 группа group

21,61±7,02*

24,96±5,46*

31,08±4,64*

Примечание: * - p<0,05 в сравнении с показателями в контрольной группе; # -  p<0,05 в сравнении с показателями второй и третьей групп,

 

Плотность капиллярной сети в группе интактных животных колебалась в пределах 33±6,5 мкм. Из таблицы видно, что плотность капилляров в ишемизированной конечности во всех исследуемых группах была выше по сравнению с контрольной: при лечении миелопидом на 10-е сутки в 1,4, на 21-е сутки – в 1,4 и на 28-е сутки – в 1,6 раза; при лечении актовегином соответственно по срокам - в 1,11, в 1,16 и 1,1 раза; при лечении солкосерилом - в 1,03, 1,0 и 1,1 раза. При сравнении эффективности актовегина и солкосерила на плотность капилляров актовегин достоверно превосходил солкосерил лишь на 21-е сутки эксперимента в 1,16. При сравнении эффективности миелопида и актовегина на плотность капилляров миелопид достоверно превосходил актовегин на всех сроках эксперимента, особенно к 28 суткам – в 1,45.

Динамика среднего диаметра венул на разных сроках эксперимента представлена в таблице 4.

Таблица 4.

Table 4

Динамика среднего диаметра венул в группах экспериментальных животных, (M+m в микрометрах, n=10)

Dynamics of average diameter of venules in experimental groups of animals (M+m µm, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

26,78±3,65

19,56±2,83

18,99±3,45

1 группа group

24,72±0,57*

19,8±0,44*

20,7±0,31*

2 группа group

23,53±0,42*

22,85±0,87*

22,24±0,65*

3 группа group

25,51±4,05*

20,88±2,35*

22,06±1,95*

Примечание: * - при p<0,05 в сравнении с контрольной группой.

Диаметр венул в интактной группе животных колебался в пределах 21,2±5,8 мкм. Из таблицы видно, что диаметр венул в ишемизированной конечности в группе животных, пролеченных актовегином, на 10 сутки был меньше на 3,3 мкм, на 21 сутки увеличился на 3,3, на 28 сутки был больше на 3,5 в сравнении с контрольной группой. После применения солкосерила на 10 сутки диаметр венул был меньше в среднем на 1,6 мкм, на 21 сутки увеличивался на 1,3, а на 28 сутки на 2,1 в сравнении с контрольной группой животных. После лечения миелопидом диаметр венул на 10 и 21 сутки был ниже, а к 28 сутки возрастал на 1,8 мкм в сравнении с контрольной группой.

Динамика уровня артериовенулярного шунтирования представлена в таблице 5.

Таблица 5

Table 5

 

Индекс артериовенулярного шунтирования (в %)

The arteriolovenular shunt index (%)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

57,4±0,03

39,7±0,08

38,7±0,15

1 группа group

48,2±0,12*

25,2±0,08*

26,5±0,07*

2 группа group

43,4±0,05*

33,3±0,09*

26,1±0,10*

3 группа group

46,5±0,06*

42,5±0,07*

29,3±0,13*

Примечание: * - при p<0,05 в сравнении с контрольной группой.

У интактных животных уровень артериовенулярного шунтирования клеблется в пределах 28,8±1,2%. Из таблицы видно, что уровень артериовенулярного шунтирования в ишемизированной конечности в группе животных, пролеченных миелопидом, на 10 сутки был меньше на 9,2%, на 21 - на 14,5%, на 28 - на 12,2% в сравнении с контрольной группой. После применения солкосерила на 10 сутки уровень артериовенулярного шунтирования был меньше в среднем на 10,9%, на 21 был выше на 2,8%, а на 28 сутки меньше на 9,4% в сравнении с контрольной группой животных. После лечения актовегином уровень артериовенулярного шунтирования на всех сроках эксперимента был ниже, особенно к 28 сутки - на 12,6% в сравнении с контрольной группой.

 Для определения нормальных показателей у интактных животных оценили уровень микроциркуляции в мышцах голени задней конечности методом ЛДФ. Полученное среднее значение уровня микроциркуляции было принято за «норму» и составило 535,22±17,53 перфузионных единиц (п.е.). Ошибка этого среднего значения (37,1) не превышает 10% от абсолютного значения, что свидетельствует о достаточном количестве единиц наблюдения в группе.

Результаты оценки уровня микроциркуляции у интактных крыс, в контрольной, опытных группах и группе сравнения с моделированием ишемии задней конечности представлены в таблице 6.

Таблица 6

Table 6

Динамика уровня микроциркуляции (M+m в абсолютных значениях перфузионных единиц, n=10)

Dynamics of the level of microcirculation (M+m in absolute perfusion units values, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

209,20±6,45

312,08±14,03

369,56±14,64

1 группа group

310,21±16,05* **

470,09±23,03* **

760,98±70,12* **

2 группа group

249,46±9,49*

398,42±26,37*

535,34±18,26* #

3 группа group

250,2±15,49*

391,92±12,14*

445,48±9,99*

Примечание: * - p<0,05 в сравнении с показателями в контрольной группе; ** -  p<0,05 в сравнении с показателями второй и третьей групп, # -   p<0,05 в сравнении с показателями третьей группы.

 

Из таблицы видно, что по сравнению с группой интактных животных уровень микроциркуляции после операции моделирования ишемии конечности в контрольной группе резко и быстро снижался, а затем медленно восстанавливался, однако до 28 суток включительно оставался достоверно ниже нормальных значений.

В первой группе у животных, получавших «Миелопид», уровень микроциркуляции по сравнению с контрольной группой – на 10 сутки возрастал на 48,3%, на 21 сутки - на 50,6%, на 28 сутки – на 105,9%. Во второй группе крыс, получавших препарат «Актовегин», уровень микроциркуляции по сравнению с контрольной был выше на 10 сутки - на 19%; на 21 сутки - на 28%; на 28 сутки - на 45%. В третьей группе крыс, получавших препарат «Солкосерил», уровень микроциркуляции по сравнению с контрольной группой возрастал на 10 сутки – на 7,6%, на 21 сутки – на 25,6%, на 28 сутки – на 20,5%. На всех сроках эксперимента уровень микроциркуляции в группе животных, получавших «Миелопид», был достоверно выше, чем во второй и третьей группах. На 28/ сутки во второй группе показатели микроциркуляции животных, получавших актовегин, были достоверно выше, чем в третьей группе животных, лечившихся солкосерилом.

Удельная площадь некроза в мышечных волокнах на различных сроках эксперимента представлена в таблице 7.

Таблица 7.

Table 7

Динамика удельной площади некроза, (M+m в %, n=10)

The dynamics of the specific area of necrosis, (M+m %, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

37,5±6

19±2,5

13,1±1,5

1 группа group

16±2,8* **

7,5±1,3* **

4±0,7* **

2 группа group

29,2±1,4*

18,3±2,2*

9±0,8*

3 группа group

23,5±2,4*

18,6±1,7*

10±1.1*

Примечание: * - p<0,05 в сравнении с контрольной группой, ** - p<0,05 в сравнении со второй и третьей группами.

У крыс, получавших «Миелопид», площадь некроза уменьшилась по сравнению с контрольной группой на 10 сутки на 21,5%, на 21 сутки – на 11,5% и на 28 сутки – на 9,1%. Площадь некроза мышц в ишемизированной конечности в группе животных на фоне лечения актовегином уменьшилась по сравнению с контрольной группой на 10 сутки на 8,3%, на 21 сутки – на 0,7% и на 28 сутки – на 4,1%. После введения солкосерила площадь некроза уменьшалась на 10 сутки в среднем на 14%, на 21 сутки – на 0,4%, на 28 сутки – на 3,1% по сравнению с контрольной группой животных. На всех сроках эксперимента в динамике морфологических изменений в ишемизированных конечностях в группе животных, пролеченных миелопидом, удельная площадь некроза была достоверно ниже, чем в опытных группах.

Динамика среднего диаметра мышечных волокон на разных сроках эксперимента представлена в таблице 8.

Таблица 8.

Table 8

Динамика среднего диаметра мышечных волокон в группах экспериментальных животных, (M+m в микрометрах, n=10)

Dynamics of the average diameter of muscle fibers in the experimental groups of animals (M+m µm, n=10)

 

 

Группы животных

Groups of animals

Сутки эксперимента

the day of the experiment

10 сутки

days

21 сутки

days

28 сутки

days

Контрольная control

16,14±4,22

10,34±2,15

8,34±1,65

1 группа group

12,1±2,5*

10,1±2,12*

10,1±0,42*

2 группа group

13,61±2,34*

9,37±1,64*

9,72±0,85*

3 группа group

14,11±2,14*

9,46±1,45*

11,01±0,55*

Примечание: * - при p<0,05 в сравнении с контрольной группой.

Средний диаметр мышечных волокон в интактной группе животных колебался в пределах 10,2±1,3. Из таблицы видно, что диаметр мышечных волокон в ишемизированной конечности в группе животных на фоне лечения миелопидом меньше в сравнении с контрольной группой на 10 сутки на 4,04 мкм, на 21 сутки – на 0,24, а на 28 сутки превосходит показатель в контрольной группе на 1,76. После лечения актовегином диаметр мышечных волокон также был меньше по сравнению с контрольной группой на 10 сутки на 2,5мкм, на 21 сутки – на 0,95, а на 28 сутки увеличивался на 1,4. После введения солкосерила диаметр мышечных волокон также меньше на 10 сутки в среднем на 2 мкм, на 21 сутки – на 0,9, однако на 28 сутки резко возрастает на 2,7 по сравнению с контрольной группой животных.

Обсуждение

До настоящего времени, все фармакологические препараты, применяющиеся для лечения критической ишемии нижних конечностей (дезагреганты, ангиопротекторы, антигипоксанты, эндотелиопротекторы) в той или иной мере улучшали различными путями микроциркуляцию в ишемизированных мышцах, но не способствовали развитию неоваскулогенеза [3.4]. Новым направлением фармакотерапии при этом заболевани является стимуляция неоваскулогенезща в ишемизированных тканях. Проведенные исследования показали преимущества препарата миелопид из клеток костного мозга над препаратами актовегин и солкосерил из крови телят. Миелопид оказывает выраженное позитивное влияние на микроциркуляцию в ишемизированной конечности которая превосходит на 10-е сутки эксперимента актовегин и солкосерил в 1,24 раза, на 21-е сутки в 1,18, а на 28-е сутки актовегин в 1,42, а солкосерил в 1,71. Достоверных различий влияния на микроциркуляцию между актовегином и соклосерилом на 10-е и 21-е сутки не выявлено, а на 28-е сутки актовегин достоверно в 1,2 раза превосходил солкосерил.

Уровень артериовенулярного шунтирования на 10-е сутки в первой группе был выше, чем во второй на 4,8% и на 1,7%, чем в третьей, на 21 сутки же ниже соответственно на 8,1% и на 17,3%, на 28 сутки ниже на 2,8%, чем в третьей и на 0,4% выше, чем во второй. Солкосерил по уровню артериовенулярного шунтирования был превосходил актовегин на 10-е сутки на 3,1%, на 21-е сутки на 9,2%, а на 28-е сутки на 3,2%.

Аналогичным образом изучаемые препараты влияли на течение ишемических повреждений мышечной ткани. Так на 10-е сутки площадь некроза мышечных волокон животных, пролеченных препаратом миелопид была достоверно меньше на 13,2%, чем в группе животных, которым вводили препарат актовегин и на 7,5% в третьей группе животных, лечившихся препаратом солкосерилом, на 21-е сутки – соответственно меньше на 10,8% и на 11,1%, а на 28-е сутки - на 5% и на 6%. При сравнении второй и третьей групп на 28-е сутки площадь некроза мышц во второй группе была на 1% меньше, чем в третьей.

Плотность капиллярной сети на 10-е сутки в первой группе превосходила в 1,25 плотность во второй группе и в 1,34 в третьей, на 21-е сутки соответственно в 1,2 и 1,4, на 28-е сутки – в 1,46 и 1,47 раза. Актовегин по плотности капиллярной сети превосходил солкосерил на 10-е сутки в 1,07, а на 21-е сутки в 1,16 раза.

Проведенные исследования показали возможность применения препарата «Миелопид» в лечении критической ишемии нижних конечностей. В основе фармакологического действия этого препарата лежат естественные иммуномодуляторы костного мозга - миелопептиды. Они действуют физиологично и эффективны в крайне низких концентрациях, а также не обладают видовой специфичностью. На их основе разработан и внедрен в клиническую практику новый иммуномодулятор – «Миелопид», который имеет в своём составе 6 миелопептидов. «Миелопид» обладает широким спектром действия. Полифункциональность пептидов костномозгового происхождения способствует стимуляции неоангиогенеза, увеличивает плотность капиллярной сети, уменьшает артериовенулярное шунтирование при ишемии конечности. В свою очередь эти эффекты уменьшают площадь некроза мышц и ускоряют их регенерацию. Поэтому можно рекомендовать включение препарата «Миелопид» в схему консервативного лечения больных с критической ишемией нижних конечностей на почве хронических облитерирующих заболеваний артерий.

В отличие от миелопида антигипоксанты (актовегин и солкосерил) меньше влияют на новообразование капилляров в ишемизированных мышцах. Восстановление микроциркуляции достигается в меньшей мере за счет стимуляции неоангиогенеза, а в большей - путем активации коллатерального кровотока в ишемизированной конечности, что увеличивает артериальный приток крови из проксимальных отделов конечности в дистальные [5.6].

Выводы.

  1. Препарат «Миелопид» способствует развитию неоваскулогенеза, улучшает микроциркуляцию, уменьшает артериовенозное шунтирование, ускоряет регенерацию поврежденной мышечной ткани при критической ишемии конечности.
  2. Целесообразно вводить в схему консервативного лечения больных хроническими заболеваниями артерий нижних конечностей при развитии критической ишемии препарат «Миелопид».

B. S. Sukovatykh

Kursk State Medical University

Author for correspondence.
Email: maks_gordov@mail.ru

Russian Federation, 305 041 Kursk, K.Marx street 3, Russian Federation

MD, Prof., the head of the department of General Surgery, Kursk State Medical University

E. B. Artyushkova

Kursk State Medical University

Email: maks_gordov@mail.ru

Russian Federation, 305 041 Kursk, K.Marx street 3, Russian Federation MD, Prof., the head of the department of General Pathology, Orel State Medical Institute.

A. Y. Orlova

Kursk State Medical University

Email: maks_gordov@mail.ru

Russian Federation, 305 041 Kursk, K.Marx street 3, Russian Federation Assitent of the Department of General Surgery, Kursk State Medical University

M. Y. Gordov

Kursk State Medical University

Email: maks_gordov@mail.ru

Russian Federation, 305 041 Kursk, K.Marx street 3, Russian Federation Applicant of the Department of General Surgery, Kursk State Medical University.

K. S. Alexandrova

Clinical City Hospital №2, Kursk

Email: maks_gordov@mail.ru

Russian Federation, 305035, Kursk, st. Dzerzhinsky, 81, Russian Federation vascular reconstructive surgery hospital №2, Kursk.

  1. Andozhskaya Y. S. Vozmozhnosti ehffektivnogo ispolzovaniya trentala v sochetanii s vnutrisosudistym oblucheniem krovi u bolnyh s obliteriruyushchim aterosklerozom arterij nizhnih konechnostej. [Possibilities of effective use of trental in combination with intravascular irradiation of blood in patients with obliterating atherosclerosis of lower limb arteries] Regionarnoe krovoobrashenie i microcirculacia.-2014.-№1.-С.68-78. (In Russ.)
  2. Barkhatov I. V. Primenenie lazernoj doplerovskoj floumetrii dlya ocenki narushenij mikrocirkulyacii[Application of laser Doppler fluometry for evaluation of disorders of microcirculation] Kazan medical journal.-2014.-T. 95, No. 1.-P. 63-69. (In Russ.)
  3. Kamenskaya O. V., Bladed, A. S., Loginova I. Yu., Levicheva E. N., Cherniavsky A. M. Funkcionalnoe sostoyanie potoka mikrocirkulyacii krovi perifericheskih tkanej u pacientov s sistemnym aterosklerozom v sochetanii s saharnym diabetom 2-go tipa. [The Functional state of the microcirculatory blood flow of peripheral tissues in patients with systemic atherosclerosis in combination with diabetes mellitus type 2] Regionarnoe krovoobrashenie i microcirculacia.-2012.-№2.-P. 16-21. (In Russ.)
  4. Kamenskaya O. V., Korentsova A. S., Karpenko A. A., Karaskov A. M., Zeidlitz G.A. Periferijnaya mikrocirkulyaciya u bolnyh s aterosklerozom arterij nizhnih konechnostej na fone metabolicheskogo sindroma [Peripherial microcirculation in patients with atherosclerosis of lower limb arteries on the background of metabolic syndrome] Angiology and vascular surgery.-2014.-Vol. 20, No. 4.-P. 20-26. (In Russ.)
  5. Kuznetsov M. R., Koshkin V. M., Karalkin A.V. Rannie reokklyuzii u bolnyh s obliteriruyushchim aterosklerozom [Early reocclusions in patients with obliterating atherosclerosis.]-Yaroslavl.: Nwasn. Medicine.-2007, 176с. (In Russ.)
  6. Kuznetsov M. R., I. V. Kosykh, Tolstikhin V. Yu., Kuznetsova V. F., Magnitsky, L. A. Sulodeksid pri lechenii zabolevanij perifericheskih arterij [Sulodexide in the treatment of peripheral arterial disease] Angiology and vascular surgery.-2015.-Vol. 21, No. 4.-P. 45-50. (In Russ.)
  7. Maystrenko D. N., Stallions F. C.,V. V. Osovski, Yakovleva.To., Krasilnikova L. A., Generalov M. I., Krotova O. A., Al-Gamers.Yu., Granov D. A., Schneider Yu. a., Grinev K. M., Rutkin I. O. Sovremennye diagnosticheskie tekhnologii v opredelenii taktiki lecheniya bolnyh s obliteriruyushchim aterosklerozom sosudov nizhnih konechnostej [Modern diagnostic technology in determining tactics of treatment of patients with obliterating atherosclerosis of vessels of lower extremities] Vestnik khirurgii.-2009.-№2.- Pp. 41-46. (In Russ.).
  8. Morozov K. M., Girina M. B., Samuelina D. S. Nekotorye aspekty patogeneza narushenij mikrocirkulyacii v kriticheskoj ishemii [Some aspects of the pathogenesis of disorders of the microcirculation in critical ischemia] Regionarnoe krovoobrashenie i microcirculacia.-2007.-No. 1.-P. 107-110. (In Russ.)
  9. National guidelines for the management of patients with vascular arterial pathology (Russian consensus document). Part 1. Peripheral artery. – M.: publishing house of the Bakulev them. A. N. After Bakulev RAMS.- 2010. – 176 p. (In Russ.)
  10. Sedov V. M., Vavilov V. N., Zaritskaya A. J. Ehffektivnost kletochnoj terapii u bolnyh s kriticheskoj ishemiej konechnosti [The efficiency of cell therapy in patients with critical limb ischemia.] Regionarnoe krovoobrashenie i microcirculacia.-2001.-№2.-P. 45-52. (In Russ.)
  11. Sukovatykh B. S., Orlova A. Yu., Artyushkova E. B., Gordov, M. Y., Videneev K.Y. Ehffektivnost mononuklearnyh frakcij autologichnogo kostnogo mozga v klinicheskom lechenii ehksperimentalnoj ishemii konechnostej [The efficiency of mononuclear fraction of autologous bone marrow in the clinical treatment of experimental ischemia of extremities ] Novosti khirurgii.- 2015.-Vol. 23, No. 4.- S. 365-371. (In Belarus.)
  12. Uchkin I.G., Zudin A. M., Baghdasaryan, A. G., Fedorovich A. A. Vliyanie lekarstvennoj terapii hronicheskogo okklyuzionnogo zabolevaniya arterij nizhnih konechnostej i na sostoyanie mikrososudov [Effect of drug therapy for chronic occlusive arterial disease of the lower extremities and on the state of the microvasculature] Angiology and vascular surgery.-2014.- T 20, No. 2.-P. 27-35. (In Russ.)
  13. Buchmayer F. Actovegin: a biological drug for more then 5 decades. Wein Med Wochenschr 2011.- Vol.161: 3-4: 80-88.
  14. Elmlinger M.W., Kriebel M., Ziegler D. Neuroprotective and Anti-Oxidative Effects of the Hemodialysate Actovegin on Primary Rat Neurons in Vitro. Neuromolecular Med 2011.- Vol.13: 4: P. 266—274.
  15. McDermott M.M. Functional impairment in peripheral artery disease and how to improve it in 2013.Curr. Car-diol. Rep.- 2013..-Vol 15, №4.- P. 347-350.
  16. Walter D. H. Intraarterial administration of bone marrow mononuclear cells in patients with critical limb ischemia: a randomized-start, placebo-controlled pilot trial (PROVASA) Circ Cardiovasc Interv. – 2011. – Vol. 4, N 1. – P. 26–37.

Views

Abstract - 344

PDF (Russian) - 238

PlumX

Dimensions


Copyright (c) 2016 Sukovatykh B.S., Artyushkova E.B., Orlova A.Y., Gordov M.Y., Alexandrova K.S.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies