The Use of Laser Technology and Aquacomplex Titanium Glitserosolvat in the Treatment of Chronic Osteomyelitis

Хронический остеомиелит остается одной из наиболее сложных проблем гнойной хирургии, что связано, в том числе, с особенностями инфекционных очагов, высокой частотой встречаемости, составляющей до 6% в структуре патологии опорно-двигательной системы и 6,8–12% в структуре гнойно-септических заболеваний, развития септических осложнений и рецидивов. Применение новых технологий в комплексном лечении хронического остеомиелита нельзя признать достаточно эффективным, что подтверждается и тем фактом, что около 70% больных с хроническим остеомиелитом теряют трудоспособность, а более 55% становятся инвалидами [3, 5, 6, 7, 8].

Значительный интерес в плане совершенствования методов лечения хронического остеомиелита представляют способы, направленные на усиление репаративного остеогенеза, поиск остеоиндуктивных и остеокондуктивных материалов, а также местные механические и физические методы воздействия. Интересным представляется также использование свойств лазерного излучения, обладающего противовоспали­тельным, иммуно­стимули­рующим, репаративным, бактеростатическим и бактерицидным действиями [1, 2, 4, 9, 10].

Цель исследования – улучшение результатов лечения хронического посттравматического остеомиелита путем применения аквакомплекса глицеросольвата титана и лазерных технологий.

Материалы и методы

Экспериментальные исследования проведены на базе научно-исследовательского института экспериментальной биологии и медицины ВГМУ имени Н.Н. Бурденко в 5 группах на 175 белых крысах с хроническим остеомиелитом: 2-х контрольных и 3-х опытных. Каждая группа включала 35 животных.

1-ю контрольную группу составили животные без лечения. Во 2-й контрольной и опытных группах проводилась хирургическая санация гнойного очага.

В 1-й опытной группе санация костной полости была дополнена применением низкоинтенсивного лазерного облучения с длиной волны 1062 нм с расстояния 8-10 см, мощностью излучения 3,5 Вт в течение 10 мин.

Во 2-й опытной группе выполнялось введение в костную полость аквакомплекса глицеросольвата титана «Тизоль». В костную полость однократно с помощью офтальмологического микрохирургического мембран­ного шпателя до заполнения вносили аквакомплекс глицеросольвата титана, что составило 0,3 грамма вещества (2 опытная группа).

В 3-й опытной группе – обработка костной полости низкоинтенсивным лазерным излучением (длина волны 1062 нм, расстояние 8-10 см, мощность излучения – 3,5 Вт, продолжительность 10 мин) с последующим введением в нее аквакомплекса глицеросольвата титана «Тизоль» (0,3 грамма).

Моделирование хронического посттравматического остеомиелита проводилось в два этапа: 1-й этап – создание костной полости и моделирование в ней асептического воспаления (1–6 сутки); 2-й этап – моделирование хронического остеомиелита (7-30-е сутки).

На первом этапе под наркозом («Золитил-100» в дозе 8 мк/кг) в асептических условиях на выбритом от шерсти участке, в области наружной поверхности нижней трети бедра, производили линейный разрез кожи, подкожно-жировой клетчатки, фасции и мышцы длиной 1,5 см, обнажали метаэпифизарную зону бедренной кости, где с помощью ручного микромоторного устройства создавали полость диаметром 3,5 мм. Полость промывали физиологическим раствором, высушивали марлевой турундой. Далее в полость вносили марлевую турунду, смоченную 1% раствором этоксисклерола, фрагменты аутокости. На кожу шелковой нитью размером 1,0 накладывали один тотальный шов.

На втором этапе, на 7-е сутки после операции, осуществляли операционый доступ к полученной полости путем иссечения послеоперационного рубца и тупого раздвигания мягких тканей с помощью однозубых крючков. В полость иглой Кассирского отверстие вводили культуру золотистого стафил­ококка в 2% агаре, содержащую около 150-200 тыс. микротел Staphilococcus aureus. Отверстие в кости пломбировали эркодонт-цементом, рану засыпали порошком пенициллина и ушивали наглухо.

Экспериментальные исследования проводились в строгом соответствии с Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986), приказом Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 №708н «Об утверждении Правил лабораторной практики», приказом Минздрава СССР №755 от 12 августа 1977 года «О мерах по дальнейшему совершенствованию форм работы с использованием лабораторных животных».

В ходе проведения экспериментальных исследований применяли клиничес­кие (общее состояние животных, местно: выраженность признаков воспаления, характер раневого отделяемого), гематологические (общий анализ крови, определение уровня окислительного стресса), микробиологические (качественная и количественная оценка результатов микробиологических посевов), рентгенологические методы исследования.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета прикладных программ StatSoft Statistica 6.1 Russian. Выполняли расчет средних значений, медианы и моды, ошибки среднего, дисперсии и стандартного отклонения, доверительного интервала, квартилей и центильных коридоров. При выявлении многомодового характера распределения, а также по данным асимметрии и эксцесса определяли характер распределения результатов исследования с помощью графического метода – построения гистограмм распределения, а также методы Колмогорова-Смирнова и Лиллиефорса. Применяли методы параметрической и непараметрической статистики (в зависимости от характера распределения): одно- и многомерный дисперсионный анализ, H-критерий Краскала-Уоллеса, в качестве апостериорного критерия использовали критерий Шеффе. В качестве критериальных статистик использовали верхнюю область 5% F-распределения, как более жесткую по сравнению с t-распределением для обеспечения большей точности оценок.

Результаты и их обсуждение

Анализ объективных данных на 7-е сутки у животных во всех группах исследования выявил угнетение общего состояния, снижение аппетита, истощение, слабую двигательную активность, сопровождающуюся хромотой; наблюдалось отдергивание конечности при пальпации в проекции костной полости. В 1-й контрольной группе окружность нижней трети бедра пораженной конечности составляла 3,05±0,14 см, во 2 контрольной – 3,02±0,1 см, в 1-й опытной – 2,98±0,09 см; во 2-й опытной – 2,95±0,1 см, в 3-й опытной группе – 2,68±0,08 см (табл. 1) В контрольных группах были выявлены гнойные свищевые ходы. В 1-й и 2-й опытных группах определялся диастаз краев ран со скудным серозно-гнойным отделяемым. В 3-й опытной группе наблюдалось серозно-гнойное отделяемое.

На 14-е сутки у животных в 1-й и 2-й контрольных группах исследования сохранялось угнетение общего состояния, снижение аппетита, выраженное истощение, слабая двигательная активность, сопровождающаяся хромотой, определялось наличие свищей с гиперемией и умеренным количеством серозно-гнойного отделяемого. В опытных группах наблюдалось улучшение общего состояния и аппетита, двигательной активности, умеренная ломкость шерстного покрова, полное закрытие раневых дефектов. В 1-й контрольной группе окружность нижней трети бедра пораженной конечности составляла 3,02±0,10 см, во 2-й контрольной – 3,00±0,09 см, в 1-й опытной группе животных – 2,75±0,10 см, во 2-й опытной –2,84±0,08 см, в 3-й опытной группе – 2,57±0,08 см.

К 28-м суткам исследования у животных 1-й контрольной группы отмечалось угнетение общего состояния и аппетита, истощение, ломкость шерстяного покрова, слабая двигательная активность, наличие свищевых ходов с зоной гиперемии и умеренным количеством серозно-гнойного отделяемого. Во 2-й контрольной группе общее состояние животных соответствовало норме, появился аппетит, но наблюдались истощение, сохранялась слабая двигательная активность. К 28 суткам исследования в опытных группах отмечалась нормализация общего состояния, аппетита и двигательной активности, патологической ломкости шерсти не было выявлено. В 1-й контрольной группе окружность нижней трети бедра пораженной конечности составляла 2,99±0,10 см, во 2-й контрольной – 2,84±0,09 см, в 1-й опытной группе животных – 2,65±0,09 см, во 2-й опытной – 2,68±0,10 см, в 3-й опытной группе – 2,42±0,08 см.

На 60-е и 90-е сутки данные объективного исследования животных 1-й контрольной группы не демонстрировали положительной динамики, сохранялись свищи с серозно-гнойным отделяемым, выраженный отек (2,98±0,11 и 3,00±0,11, соответственно). При пальпации зоны поражения и движении животные щадили поврежденную конечность. К 60-м суткам у животных 2-й контрольной группы исследования диаметр нижней трети бедра составил 2,72±0,11 см, в 1-й опытной – 2,43±0,08, во 2-й опытной – 2,47±0,08 см, в 3-й опытной – 2,37±0,07 см.

К 90 суткам общее состояние животных 2-й контрольной группы нормализовалось, но тусклость шерстного покрова сохранялась. При движении животные 2-й контрольной и опытных групп полностью использовали поврежденную конечность, местные признаки воспаления отсутствовали. Окружность бедра поврежденной конечности к 90 суткам у животных 2-й контрольной группы составила 2,54±0,12 см, 1-й опытной – 2,32±0,11, 2-й опытной – 2,39±0,08 см, 3-й опытной – 2,26±0,07 см.

Таким образом, наиболее быстрое купирование местных и общих проявлений клинической картины хронического остеомиелита наблюдалось при применении комплексного лечения, основанного на сочетанном использовании хирургической санации гнойного очага, низкоинтенсивного лазерного облучения и аквакомплекса глицеросольвата титана «Тизоль» (3-я опытная группа), что заключалось в закрытии раневого дефекта к 14 суткам; нормализация общего состояния, аппетита и двигательной активности к 28 суткам исследования окружности бедра поврежденной конечности к 90-м суткам наблюдения.

Показатели окислительного стресса

Динамику окислительного стресса изучали путем анализа свободнорадикальных процессов в организме, которые оценивали по уровню перекисного окисления липидов (малонового диальдегида /МДА/) и окислительной модификации белков (содержание карбонильных групп в реакции с 2,4-динитрофенилгидразином).

При анализе перекисного окисления липидов на 7-е сутки было отмечено, что в 1-й контрольной группе уровень МДА составил 43,12±4,17 нмоль/л и более, что практически в 2 раза превысило значение данного показателя у интактных животных. Значение МДА во 2-й контрольной группе составило 41,58±2,9 нмоль/л и свидетельствовало о повышение интенсификации процессов ПОЛ. В опытных группах процесс перекисного окисления липидов протекал менее интенсивно, чем в контрольных. Уровень МДА был равен в 1-й опытной группе 34,02±2,73 нмоль/л, во 2-й опытной – 33,85±2,35 нмоль/л, в 3-й опытной – 28,47±3,05 нмоль/л.

В 1-й и 2-й контрольных группах уровень ДНФГ составил 80,97±3,22 и 77,33±2,23 нм/мг белка, соответственно (рис. 1). В опытных группах выявлена положительная динамика ОМБ по сравнению с контрольными группами. Уровень ДНФГ в 1-й и 2-й опытных группах составил 66,01±3,14 и 64,05±2,35 нм/мг белка, соответственно. В 3-й опытной группе данный показатель равнялся 58,44±3,28 нм/мг, что было достоверно ниже по сравнению с 1-й и 2-й контрольными группами.

К 14-м суткам исследования в 1-й и 2-й контрольных группах сохранялся высокий уровень МДА – 40,54±3,01 нмоль/л и 39,81±5,34 нмоль/л, соответственно, что свидетельствовало о снижении регенераторной способности тканей в очаге воспаления (рис. 2). При применении в комплексе лечения хирургической и лазерной санации патологического очага отмечено статистически достоверное снижение уровня МДА (27,01±2,93 нмоль/л). В группе лабораторных животных, где в комплекс лечения была включен аквакомплекс глицеросольвата титана, в отношении ПОЛ наблюдалась тенденция, аналогичная группе с применением лазерной санации – содержание МДА составило 26,02±2,24 нмоль/л. При сочетании лазерной санации и внесения в полость аквакомплекс глицеросольвата титана происходило статистически достоверное (p<0,05) снижение уровня МДА по сравнению с 7-ми сутками (19,83±1,56 нмоль/л).

К 28-м суткам исследования в 1-й контрольной группе сохранялась высокая активность ПОЛ на фоне гнойно-воспалительного процесса. Уровень МДА в данной группе составил 40,01±3,26 нмоль/л (рис. 3). В сыворотке лабораторных животных 2-й контрольной группы не отмечалось статистически достоверных отличий содержания МДА по отношению к 1-й контрольной группе (37,27±1,64 нмоль/л). В опытных группах показатель ПОЛ снизился и приблизился к нормальным значениям, что подтверждало эффективность проводимого лечения.

На 28-е сутки исследования в 1-й контрольной группе процессы ОМБ не имели достоверных различий по сравнению с 14-ми сутками, содержание ДНФГ составило 78,02±2,15 нм/мг белка (рис. 4). Во 2-й контрольной группе отмечалась динамика, аналогичная 1-й контрольной группе. В данной группе уровень ДНФГ составил 65,11±2,72 нм/мг белка. При оценке уровня карбонильной модификации белков у экспериментальных животных опытных групп отмечалось его повышение по сравнению с интактными животными. Однако он был достоверно ниже (p<0,05), чем у животных контрольных групп и составил в 1-й опытной группе 55,94±2,72 нм/мг белка, во 2-й опытной группе – 53,58±2,13 нм/мг белка, в 3-й опытной группе – 50,24±2,44 нм/мг белка.

К 60-м суткам исследования уровень МДА в 1-й контрольной группе составил 39,28±4,65 нмоль/л, во 2-й контрольной группе – 36,91±3,12 нмоль/л. В 1-й и 2-й опытных группах отмечалась положительная динамика по сравнению с 28-ми сутками (рис. 5). Уровень МДА приблизился к показателю у интактных животных и составил в 1-й опытной группе 17,97±1,54 нмоль/л; во 2-й опытной группе – 17,01±0,92 нмоль/л; в 3-й опытной группе – 14,86±1,93 нмоль/л, что практически соответствовало уровня показателя у интактных животных.

Свободнорадикальному окислению липидов сопутствовала активация карбонильной модификации белков. В 1-й контрольной группе сохранялся высокий уровень ДНФГ (77,07±1,93 нм/мг белка) (рис. 6). У лабораторных животных 2-й контрольной группы произошло снижение уровня ОМБ до уровня 59,61±2,04 нм/мг. В опытных группах отмечалась выраженная положительная динамика. Уровень ДНФГ в 1-й и 2-й опытных группах составил 50,64±2,18 и 50,07±1,66 нм/мг, соответственно. В 3-й опытной группе данный показатель приблизился к уровню интактных животных и составил 48,59±1,99 нм/мг белка.

К 90-м суткам исследования сохраняющаяся высокая активность процессов ПОЛ в 1-й контрольной группе коррелировала с тяжестью течения патологического процесса. Уровень МДА в данной группе составил 38,30±4,20 нмоль/л, что превысило аналогичный показатель у интактных животных на 165,97%. Во 2-й контрольной группе содержание МДА претерпело положительную динамику и достоверно отличалось от 1-й контрольной группы (35,30±2,74 нмоль/л). В 1-й и 2-й опытных группах, несмотря на выраженную положительную динамику, уровень МДА остался выше нормальных значений и составил 16,18±0,82 и 15,98±1,50 нмоль/л. Анализируемый показатель в группе животных с комплексным применением лазерной санации и препарата «Тизоль» составил 14,40±1,67 нмоль/л.

К данному экспериментальному сроку сохранялась высокая активность процессов ОМБ у лабораторных животных 1-й и 2-й контрольных групп, содержание ДНФГ составило 76,95±1,73 и 56,99±1,69 нм/мг, соответственно. В 1-й и 2-й опытных группах, аналогично уровню МДА, снизилось содержание ДНФГ, но не достигло значений интактных животных. В 3-й опытной группе процесс ОМБ пришел в соответствие с физиологической нормой и составил 46,26±2,10 нм/мг.

Анализ свободнорадикальных процессов в организме. Антиоксидантная защита организма

В ходе проведенных исследований было установлено, что на 7-е сутки уровень SH-групп в 1-й контрольной группе составил 107,45±3,12 мг%, во 2-й контрольной группе – 112,74±5,93 мг% (рис. 7). В опытных группах в ответ на активацию процессов ПОЛ и ОМБ, происходило адекватное повышение неферментативного звена антиоксидантной системы защиты. В 1-й опытной группе уровень SH-групп составил 117,11±6,81 мг%. Во 2-й и 3-й опытных группах уровень SH-групп статистически достоверно отличался от контрольных групп и составил 118,51±3,21 и 124,15±2,53 мг%, соответственно.

На данный экспериментальный срок в контрольных группах наблюдалось статистически достоверное снижение уровня ферментативного звена АОС. Содержание СОД в 1-й контрольной группе составило 0,40±0,03 усл.ед., во 2-й контрольной группе – 0,50±0,07 усл.ед.; в 1-й опытной группе составил 1,52±0,04 усл.ед., во 2-й опытной группе – 1,60±0,03 усл. ед., в 3-й опытной группе – 1,96±0,02 усл.ед. (рис. 8).

К 14-м суткам исследования в контрольных группах происходило снижение содержания SH-групп на фоне высокой активности свободнорадикальных процессов. Содержание SH-групп составило в 1-й опытной группе 107,82±6,13 мг%, во 2-й опытной – 109,22±3,76 мг%, в 3-й опытной – 115,29±5,71 мг%.

В контрольных группах на 14-е сутки исследования происходила достоверная инактивация СОД (рис. 9). Уровень СОД составил в 1-й контрольной группе 0,35±0,03 усл.ед., во 2-й контрольной – 0,43±0,04 усл.ед.

На 28-е сутки исследования содержание SH-групп составило в 1-й контрольной группе 68,25±4,62 мг%, во 2-й контрольной – 70,09±4,50 мг% (рис. 10). В опытных группах происходило снижение уровня SH-групп. Однако данный показатель был достоверно выше, чем в контрольных группах. Сохранялась корреляция между снижением уровня СРО и показателем неферментативного звена АОС. В 1-й опытной группе уровень SH-групп составил 73,97±5,14 мг%, во 2-й опытной – 74,60±7,26 мг%, в 3-й опытной – 78,59±11,24 мг%.

К 28-м суткам активность фермента СОД в контрольных группах снижалась аналогично SH-группам (рис. 10). В опытных груп­пах уровень СОД на фоне снижения активности ПОЛ и ОМБ был достоверно выше по сравнению с контрольными группами (p<0,05). Адекватное функ­цио­нирование АОС препятствовало формированию окислительного стресса.

На 60-е, также как и на 90-е сутки в контрольных группах сохранялся окислительный стресс, снижающий резервные возможности АОС и усугубляющий эндогенную интоксикацию. В опытных группах на фоне проводимой терапии отмечалась сбалансированность процессов в системе свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты. Наиболее выраженная положительная динамика отмечалась на фоне комбинированного применения лазерной санации и аквакомплекса глицеросольвата титана, где значения показателей не превышали их уровень у интактных животных.

Таким образом, при моделировании хронического остеомиелита было выявлено развитие патологической активности процессов свободно­радикаль­ного окисления на фоне низкой активности системы антиоксидантной защиты. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности включения струйной санации, низкоинтенсивного лазерного облучения и аквакомплекса глицеросольвата титана в комплекс лечения хронического остеомиелита, что подтверждается выявленным нормализующим эффектом на показатели свободнорадикального окисления, способствующего стабилизации метаболических процессов и более благоприятному течению воспаления.

Результаты рентгенологических 
методов исследования

По данным рентгенологического исследования оценивали форму и величину костных полостей, секвестров, степень их демаркации, состояние остальных отделов кости, степень развития секвестральной коробки, эффективность секвестрэктомии, отторжение оставшихся неудаленных секвестров и образование новых. В 1-й контрольной группе на 14 и 28-е сутки определялся остеомиелит бедренной кости: секвестры, изъеденные по краям, окруженные секвестральной коробкой с толстыми плотными стенками. Во 2 контрольной группе виден длинный пластинчатый секвестр, расположенный центрально в костномозговой полости и окруженный толстыми плотными стенками, состоящими из старого коркового слоя и слившейся с ним новообразованной кости (рис. 11). Во всех контрольных группах наблюдались свищи в средней трети бедра по переднелатеральной поверхности. В 1-й и 2-й опытных группах на 14 и 28-е сутки группы на рентгенограммах отмечались зоны склероза и утолщения кости – несколько полостей с заключенными в них пластинчатыми секвестрами.

При поздних сроках исследования на 60-е и 90-е сутки очаги деструкции костной ткани выражены в меньшей степени и локализуются в толще кортикального слоя и в губчатом веществе метафиза (рис. 12). Они множественные, мелкие, неправильно-округлой или вытянутой формы, с нечеткими контурами. Сливающиеся между собой очаги деструкции создают картину пятнистых просветлений. Кость становится прозрачной. Кортикальный слой представляется неравномерно истонченным. Во 2-й опытной группе отмечается заметное уменьшение очагов деструкции и сочетание очагов остеосклероза с остеопорозом. В некоторых полостях видны мелкие секвестры. Костно-балочная структура метафиза просматривается не четко. Во 2-й опытной группе наблюдались более выраженные, по сравнению с 1-й опытной группой, признаки регенерации в виде теней регенерата, расположенного по краям костного дефекта (рис. 13). В 1-й и 2-й опытных группах отмечалось слияние наружной кортикальной пластинки в единое целое с остальной частью метафиза. Дифференцировки на кортикальный слой и костномозговое пространство не происходило. Область создаваемого дефекта не прослеживалась. При рентгенологическом исследовании у животных 3-й опытной группы сохранялось периостальное утолщение кости.

При деструкции ростковой пластинки частично или полностью соединялся метафиз с эпифизом. Диафизарная часть при хроническом остеомиелите утолщена, склерозирована, структура ее неоднородна, костномозговой канал сужен или отсутствует совсем. На 90-е сутки бедренные кости лабораторных животных 3-й опытной группы имели чёткий рисунок и хорошо выраженные границы кортикального слоя. Костный дефект был полностью заполнен гомогенными тенями новообразованной костной ткани. Свищевых ходов и секвестров не наблюдалось.

Выводы

1. Моделирование хронического остеомиелита по разработанной методике позволяло к 31-м суткам сформировать хронический остеомиелит со свищами с гнойным отделяемым, что подтверждалось данными клинических, бактериологи­ческих, рентгенологических исследований.

2. Разработанный метод комплексного лечения хронического остеомиелита, основанный на сочетанном применении лазерных технологий и аквакомплекса глицеросольвата титана способствует достоверному сокращению сроков закрытия раневого дефекта; нормализации общего состояния и двигательной активности, показателей свободнорадикального окисления.

Рис. 1. Динамика уровня ДНФГ на 7-е сутки исследования. Fig. 1. Dynamics of DNPH level on the 7th day study.

* - достоверность различий по сравнению с интактными животными, p<0,05; # - достоверность различий по сравнению с 1-й контрольной группой, p<0,05; ~ - достоверность различий по сравнению со 2-й контрольной группой, p<0,05

* - Significant differences in comparison with intact animals , p <0,05; # - Significance of differences compared to the 1st control group , p <0,05; ~ - Significance of differences compared to the 2nd control group , p <0,05

Рис. 2. Динамика уровня МДА на 14-е сутки исследования. Fig. 2. Dynamics of the MDA level on the 14th day study.

Рис. 3. Динамика уровня МДА на 28-е сутки исследования. Fig. 3. Dynamics of the MDA level on the 28th day study.

Рис. 4. Динамика уровня ДНФГ на 28-е сутки исследования.

Fig. 4. Dynamics of DNPH level on the 28th day study.

Рис. 5. Динамика уровня МДА на 60-е сутки исследования.

Fig. 5. Dynamics of the MDA level on the 60th day study.

Рис. 6. Динамика уровня ДНФГ на 60-е сутки исследования.

Fig. 6. Dynamics of DNPH level on the 60th day study.

Рис. 6. Динамика уровня ДНФГ на 60-е сутки исследования.

Fig. 6. Dynamics of DNPH level on the 60th day study.

Рис. 7 Динамика уровня SH-групп на 7-е сутки исследования.

Fig. 7. Dynamics of SH- groups on 7th day study.

Рис. 8. Динамика уровня СОД на 7-е сутки исследования.

Fig. 8. Dynamics SOD level on the 7th day study.

Рис. 9. Динамика СОД на 14-е сутки исследования.

Fig. 9. Dynamics of SOD on the 14th day study.

Рис. 10. Динамика уровня SH-групп на 28-е сутки исследования. / Fig. 10. Dynamics of SH- groups on the 28th day study.

Рис. 11. Рентгенограмма бедренной кости крысы, 28-е сутки А) 1-я контрольная группа; Б) 2-я контрольная группа; В) 1-я опытная группа / Fig. 11. Radiographs of the femur of rat , the 28th day. A) 1st control group ; В ) 2nd control group ; С) 1st test group

Рис. 12. Рентгенограмма бедренной кости крысы, 1-я опытная группа, 60-е сутки.

Fig. 12. Radiographs of the femur of rat 1st test group, 60 th day.

А

А

Б

Рис. 13. Рентгенограмма бедренной кости крысы, 3-я опытная группа, 90-е сутки.

Fig. 13. Radiographs of the femur of rat 3rd test group, 90 hours.

В

В

С